單克隆抗體定制

單克隆抗體多克隆抗體定制

1. 重組蛋白定制
（1）原核表達(dá)系統(tǒng)：
將克隆化基因插入合適載體后導(dǎo)入原核生物用于表達(dá)大量蛋白質(zhì)的方法一般稱為原核表達(dá)。主要包括：大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)、枯草芽孢桿菌表達(dá)系統(tǒng)、鏈霉菌表達(dá)系統(tǒng)等，其中應(yīng)用廣泛的是大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)。    
（2）酵母表達(dá) ：
酵母表達(dá)系統(tǒng)是研究真核蛋白質(zhì)表達(dá)和分析的有力工具，擁有轉(zhuǎn)錄后加工修飾功能，適合于穩(wěn)定表達(dá)有功能的外源蛋白質(zhì)。與昆蟲表達(dá)系統(tǒng)和哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)相比，酵母表達(dá)系統(tǒng)操作簡便，成本低廉，可大規(guī)模進(jìn)行發(fā)酵。
（3）哺乳動物細(xì)胞表達(dá)：
哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)勢在于能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的正確折疊，提供復(fù)雜的N型糖基化和準(zhǔn)確的O型糖基化等多種翻譯后加工功能，因而表達(dá)產(chǎn)物在分子結(jié)構(gòu)、理化特性和生物學(xué)功能方面接近于天然的高等生物蛋白質(zhì)分子。
目前已有許多重要的蛋白及糖蛋白利用哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)大量制備、生產(chǎn)。如：人組織型血纖蛋白酶原激活因子、凝血因子Ⅷ、干擾素、乙肝表面抗原、紅血球生成激素、人生長激素等。

2. 單克隆抗體制備
抗原上可以引起機(jī)體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu)，叫做抗原決定簇，抗原通常是由多個(gè)抗原決定簇組成的。單克隆抗體是針對專一的抗原決定簇產(chǎn)生的抗體，主要原理是利用產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞雜交融合成雜交瘤細(xì)胞，來生產(chǎn)抗體。 

3. 多克隆抗體制備
抗原上可以引起機(jī)體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu)，叫做抗原決定簇，抗原通常是由多個(gè)抗原決定簇組成的，由多種抗原決定簇刺激機(jī)體，相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體，機(jī)體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體;同樣一類抗原決定簇，也可刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體。

4. 蛋白純化
包涵體變復(fù)性
親和層析、離子交換層析、凝膠過濾層析、疏水層析純化規(guī)模：毫克-克級
蛋白除菌、除內(nèi)毒素
蛋白凍干