微核試驗的應(yīng)用與方法

　　微核試驗是檢測染色體或有絲分裂器損傷的一種遺傳毒性試驗方法。無著絲粒的染色體片段或因紡錘體受損而丟失的整個染色體，在細(xì)胞分裂后期仍留在子細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)成為微核。

　　

　　目的：化學(xué)物質(zhì)遺傳毒性評價。

　　

　　原理：通過染色體丟失或斷片形成而出現(xiàn)的微核檢測染色體異常。

　　

　　步驟與結(jié)果：常用的是嚙齒類動物骨髓嗜多染紅細(xì)胞(PCE)微核試驗。以受試物處理嚙齒類動物，然后處死，取骨髓，制片、固定、染色，于顯微鏡下計數(shù)PCE中的微核。如果與對照組比較，處理組PCE微核率有統(tǒng)計學(xué)意義的增加，并有劑量-反應(yīng)關(guān)系，則可認(rèn)為該受試物是哺乳動物體細(xì)胞的致突變物。

　　
 

　　用微核試驗來評價藥物、放射線、有毒物質(zhì)等對人體細(xì)胞或體外培養(yǎng)細(xì)胞遺傳學(xué)損傷仍是一個直觀有效可行的方法,在遺傳毒理、醫(yī)學(xué)、食品、藥物、環(huán)境等諸多方面得到了廣泛的應(yīng)用。微核計數(shù)經(jīng)濟,迅速,簡便,不需要特殊技能,可以統(tǒng)計更多的細(xì)胞并實現(xiàn)計算機自動計數(shù)。若采用核型穩(wěn)定的細(xì)胞,確立統(tǒng)一的操作協(xié)議,進行實驗室間的合作建立數(shù)據(jù)庫,應(yīng)用探針技術(shù)的微核試驗很可能被納入遺傳毒理學(xué)試驗。微核試驗技術(shù)的種類很多，包括常規(guī)微核試驗、細(xì)胞分裂阻滯微核分析法、熒光原位雜交試驗與DNA探針與抗著絲粒抗體染色等方法。

　　

　　1、動物體內(nèi)細(xì)胞微核：主要有骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗；外周血淋巴細(xì)胞微核試驗。

　　

　　2、細(xì)胞培養(yǎng)微核試驗；

　　

　　3、蠶豆根尖微核試驗：實驗所用的蠶豆為松滋青皮豆，通過浸種、催芽、染毒、恢復(fù)培養(yǎng)、固定、孚爾根染色等步驟后，進行鏡檢。