有哪些辦法可以對細胞進行分選

　　細胞分選是根據(jù)細胞所具有的特性將某種特定的細胞亞群從混合的細胞樣品中分離出來的一種技術(shù)，是細胞學研究的重要課題。在需要對某種特定的細胞進行功能分析時，如對細胞培養(yǎng)上清液通過ELISA分析檢測細胞分子、細胞共培養(yǎng)檢測細胞功能等研究都以獲得高純度的目的細胞為前提。

　　常用的細胞分選的方法有兩種：流式細胞分選和免疫磁性細胞分選。

　　一、流式細胞分選

　　流式細胞分選是在流式細胞術(shù)檢測細胞表型的基礎(chǔ)上，使用充電分選技術(shù)以實現(xiàn)多種特定表型細胞的分離。具有分選參數(shù)多、群體多、純度高、靈活性強等優(yōu)勢。分選后細胞可做進一步分子生物學研究如熒光定量PCR、WB、細胞培養(yǎng)等。

　　基于流式細胞術(shù)的技術(shù)基礎(chǔ)，根據(jù)顆粒特性實現(xiàn)細胞分選而廣泛應(yīng)用于免疫學、細胞生物學、腫瘤學、血液學、藥物開發(fā)以及環(huán)境檢測等各方面科學研究和工作中。

　　二、免疫磁性細胞分選

　　免疫磁珠細胞分選是基于細胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性抗體結(jié)合的特性，在外加磁場中，通過抗體與磁珠相連的細胞被吸附而滯留在磁場中，而無該種表面抗原的細胞由于不能與連接著磁珠的特異性抗體結(jié)合不具磁性，從而不在磁場中停留達到細胞分離的目的。磁珠細胞分選所需設(shè)備簡單，對技術(shù)人員要求不高，分選所得細胞靈敏度高、純度好且細胞活性和復蘇率較好，對于下游應(yīng)用影響較小，應(yīng)用前景較廣。

　　免疫磁性分選策略

　　免疫磁珠細胞分選依據(jù)可以分為兩類。一類是根據(jù)所標記細胞的不同分為陽性分選和陰性分選；另一類是根據(jù)分選方法不同分為直接分選法和間接分選法。

　　(1)依據(jù)標記細胞的不同分類

　　陽性分選：將目的細胞相對應(yīng)的特異性抗體與磁珠相連后加入混合細胞懸液進行孵育。在抗原抗體發(fā)生特異性結(jié)合后，以磁分離的方式將目的細胞分離出來。

　　陰性分選：從多細胞懸液中分離去除非目的細胞最后得到目的細胞。但在靶細胞的細胞數(shù)所占比例比較小時，分選過程中存在的非特異性吸附會直接導致目的細胞的損失。

　　復合分選：是聯(lián)合兩種以上的分選策略進行分選，例如先陰性分選去除非目的細胞，再陽性分選分離目的細胞等。此種方法主要用于細胞亞群的分選或是分離得到高純度的稀有細胞。

　　2)根據(jù)不同分選方法分類

　　直接分選法：將抗體或親和配體直接包被在磁性顆粒上，形成免疫磁性復合顆粒。將其與多細胞懸液混合孵育之后，目的細胞會特異性的結(jié)合在免疫磁珠上，在外加磁場的作用下，帶有磁珠的目的細胞滯留在磁場中，而非目的細胞則會被去除。

　　間接分選法：目的細胞首先與對應(yīng)的一抗孵育，激活細胞之后清洗去除未結(jié)合的一抗，后再加入預先包被有二抗的磁性顆粒與活化后的細胞進行孵育，一抗與二抗之間的相互作用使得磁粒結(jié)合在目的細胞上，同樣在磁場作用下滯留目的細胞達到分選目的。