簡單介紹ELISA試劑盒的三種類型

　　試劑盒是用于盛放檢測化學成分、藥物殘留、病毒種類等化學試劑的盒子。一般醫院、制藥企業使用。

　　ELISA大致分為五種類型：直接法、間接法、競爭法、夾心法、捕獲包被法。在商品化試劑盒中用得比較多的是雙抗體夾心法、競爭法和間接法。

　　夾心法

　　雙抗體夾心法是夾心法中的一種主要形式，夾心法分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法：

　　雙抗體夾心法中抗原的2個不同的抗原表位被兩個抗體-捕捉抗體和檢測抗體，分別結合。捕捉抗體固定于載體即酶標板上，檢測抗體通過結合抗原進行顯色分析。

　　應用于雙抗體夾心法檢測的捕捉抗體通常是單抗，偶爾有用多抗做為捕捉抗體的情況，但很少見，因為以多抗作為捕捉抗體容易出現交叉反應而降低特異性。

　　檢測抗體通常為多抗，在商業化的科研試劑盒中經常用到生物素標記的山羊多抗，再讓生物素標記的多抗與HRP標記的親和素或者鏈霉親和素結合，然后再加HRP也就是辣根過氧化物酶的底物，通常是TMB反應顯色，這種方法是在傳統的HRP酶標記抗體的雙抗體夾心法ELISA中引入了生物素-親和素放大系統。

　　競爭法

　　競爭法也是一種很常用的方法，一起看看：

　　競爭法是用樣本中的游離抗體/抗原與固相的酶標抗體/抗原競爭性結合的分析方法。當游離抗體(或抗原)濃度越高，則能與固定抗原(或抗體)結合的酶標抗體(或抗原)就越少，后續顯色就越淺，即與對照相比，顯色越淺，表示檢測樣本中抗體(或抗原)含量越高。

　　該法特別適合小分子物質的檢測也可用于檢測比較不純的樣本，且重復性好，但是檢測的靈敏度和專一性較差。競爭法測抗原常用于檢測小分子抗原及半抗原，這類抗原通常缺乏兩個以上的識別位點，不適用于雙抗夾心法進行測定。該方法在商業化試劑盒中被廣泛運用。

　　間接法

　　間接法只能用于測定抗體，主要用于疾病的診斷，其優點是只需要改變包被抗原，酶標抗體是通用的。間接法使用了二抗增加信號強度，也使抗體的選擇多樣化，然而間接法容易產生交叉反應。